Лизирующий буфер для эритроцитов/Red Blood Cell Lysis Buffer, 500 мл, Servicebio

Применение

• Образцы тканевых клеток:
• cвежую ткань расщепляли трипсином или коллагеназой и диспергировали в суспензию отдельных клеток, а супернатант отбрасывали центрифугированием;
• к клеточному осадку добавить лизат эритроцитов в соотношении 1:3-5, аккуратно продуть и перемешать, лизировать в течение 1-2 мин;
• центрифугировать 800-1000 об/мин в течение 5-8 мин, затем удалить верхнюю красную жидкость;
• собрать осадок, добавить раствор Хэнка или бессывороточную культуральную среду и центрифугировать 2-3 раза;
• повторите шаги 2 и 3, если расщепление не завершено;
• ресуспендировали клетки в соответствующем растворе в соответствии с экспериментальными потребностями для последующих экспериментов; Для экстракции РНК раствор, приготовленный с водой DEPC, лучше всего начинать на этапе 4.
• Клетки крови:
• свежую антикоагулянтную кровь, центрифугируйте для удаления надосадочной жидкости;
• добавьте лизат эритроцитов в осадок клеток в соотношении 1:6-10, осторожно продуйте и перемешайте, и лизируйте в течение 1-5 минут;
• центрифугируйте 800-1000 об/мин в течение 5-8 минут, затем удалите верхнюю красную жидкость;
• соберите осадок, добавьте раствор Хэнка или бессывороточную культуральную среду и центрифугируйте 2-3 раза;
• повторите шаги 2 и 3, если расщепление не завершено;
• ресуспендировали клетки в соответствующем растворе в соответствии с экспериментальными потребностями для последующих экспериментов. Для экстракции РНК лучше всего начать с шага 4 с раствора, приготовленного на воде DEPC.